纳米抗体制备

MD Pharma生物提供驼科动物VHH抗体文库构建服务，包括抗原制备、免疫、抗体文库菌株构建、纳米抗体筛选及ELISA验证等相关实验。

纳米抗体服务简介
纳米抗体(Nanobody)在多个方面均优于传统抗体。基于驼科动物重链抗体的VHH单域抗体的特殊结构，兼具了传统抗体与小分子药物的优势，可以有效克服传统抗体开发周期长、稳定性较低、保存条件苛刻等缺陷，逐渐成为新一代治疗性生物医药与临床诊断试剂中的新兴力量。
相比于常规抗体，纳米抗体的优势包括：
分子量小，可穿透血脑屏障
可以在原核或真核系统中高表达
特异性强、亲和力高
对人的免疫原性弱等

M13 噬菌体展示技术
噬菌体展示技术（phage display）是将外源编码多肽或蛋白质的基因通过基因工程技术插入到噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置，在阅读框能正确表达，使外源多肽或蛋白在噬菌体的衣壳蛋白上形成融合蛋白，随子代噬菌体的重新组装呈现在噬菌体表面，可以保持相对的空间结构和生物活性。
然后，利用靶分子，采用合适的淘洗方法，洗去未特异性结合的噬菌体。接着，用酸碱或者竞争的分子洗脱下结合的噬菌体，中和后的噬菌体感染大肠杆菌扩增。经过多轮的富集，逐步提高可以特异性识别靶分子的噬菌体比例，最终获得识别靶分子的多肽或者蛋白。

噬菌体文库的构建与纳米抗体的淘选
MD Pharma生物可以提供未经免疫的、足龄（24-36月龄）的骆驼进行抗原免疫。按照标准免疫方法，每个项目免疫4-6针。免疫期间，我们为客户提供ELISA效价测定服务，保证抗血清ELISA效价合格后采血分离PBMC。
MD Pharma生物采用M13噬菌体的pIII蛋白进行VHH抗体(纳米抗体)表面展示。我们的科学家构建了带有HA和6*His tag双标签的噬菌粒载体，同时制备出了具有10 8 转染效率的TG1宿主菌感受态，经过2-3次转染与扩增，能够为客户提供有效库容量大于10 8 的高质量VHH抗体展示文库。经过几轮纳米抗体文库淘筛，即可获得至少20株具有高亲和力的噬菌体株。