MD Pharma生物学和药理学部提供高通量筛选服务，我们拥有强大的级联筛选小分子抑制剂、体外的酶活性和细胞活性检测开发，以及高通量筛选分析能力。
高通量筛选技术简介
高通量筛选(HTS)是药物发现中的一个关键技术，用于从化合物库中识别可能成为药物化学优化的候选化合物。该技术体系应用了药理学技术、分子生物学技术、细胞生物学技术、计算机技术、管理技术以及自动化控制技术等，实现了药物筛选的快速、高效、微量化、自动化和规模化。
随着高通量筛选技术的发展，可以更加快速高效地筛选大量化合物，从而加快药物发现的速度。MD Pharma生物学和药理学部提供高通量筛选服务，我们拥有强大的级联筛选小分子抑制剂、体外的酶活性和细胞活性检测开发能力。
药物发现中的高通量筛选过程涉及筛选大型化合物库，以找到影响生物靶点的潜在候选化合物。这些候选化合物通常被称为“苗头化合物” [1] 。MD Pharma生物部拥有超过 3000 种化合物的库，化合物筛选能力可以是 200x384 孔板/周，也可以根据客户的需求进行定制。同时我们与 Selleck、MCE、Tocris和TargetMol 等提供化合物库的合作伙伴密切合作。
高通量筛选过程可以通过各种方法来实现，包括读板器以及相应的软件来处理和分析所获得的数据。一旦发现这些潜在的“苗头化合物”，对高通量筛选数据的进一步分析还可以提供有关第一轮筛选期间获得的这些“hits”的潜在优化的信息 。
MD Pharma的高通量筛选服务可以做
级联筛选是药物发现过程中识别和选择先导化合物系列的一套测定方法，作为一种多层次的生物化学或药物研究方法，通常用于筛选药物或化合物库以寻找潜在的药物先导化合物。这种方法涉及多个生物学活性的级别，以便筛选潜在的药物目标。在这个过程中，可能会发现一些具有潜力的"先导化合物"，这些化合物可以进一步开发成为新药物。
开发小分子抑制剂需要强大的级联筛选，来有效地识别与靶蛋白结合的化合物，确定对不需要的相关蛋白的选择性，并在下游功能测定中证明活性。
靶标验证、分析开发、二次筛选、ADME/Tox 和先导化合物优化等领域越来越多地使用 HTS 技术。
酶活性的变化可以快速调节机体的生理功能或病理过程，激酶、蛋白酶和肽酶是最常见的药物靶点。利用酶活性分析技术可以快速、高效地评估化合物对目标酶的抑制能力，从而筛选出具有潜力的候选化合物。
酶活性检测的方法包括酶反应的底物、产物等，反应大多在均相的环境下进行
【酶分析方法开发- 关键因素】
酶分析方法优化和验证常采用酶滴定法、时间进程分析、米式常数测定、DMSO耐受性、Z-prime 测试和化合物验证等。
酶滴定和时间进程分析
注：窗口（信号本底比）>3
ATP Km 和底物 Km
注：选择接近Km值的底物浓度
DMSO耐受性：测试测定中可以耐受的最大DMSO浓度
注：DMSO 通常小于 1%
Z’：代表板的均匀性。σ=SD，μ=mean
注：Z’>0.5 将作为酶法检测的 QC 标准
化合物验证：使用参考化合物来检测测试的重现性
注：IC50应为已发布值的5倍
IC50 报告标准
细胞活性筛选是新药筛选中的常用方法，在细胞层面上评估化合物的活性和毒性，能够很好地模拟药物在体内的作用情况。基于细胞的检测已在制药行业的药物筛选中占据了一定的地位。这些测定能够通过功能表征潜在药物靶标在细胞中的作用以及评估药物先导化合物的特异性和功效来评估潜在药物靶标 [2] 。MD Pharma的体外细胞检测服务包括：
表型测定
功能测定
细胞中的蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）
【细胞检测开发 - 细胞毒性测试】
仅使用高通量筛选不能完全评估潜在药物，因为此评估还需要进一步进行毒性研究。相反，高通量筛选对于消除在研究对生物靶标影响很小或没有预期影响的化合物上浪费的时间至关重要。通过利用这种自动筛选过程，可以一起筛选数百万种化合物，并消除没有效果或效果差的化合物 [1] 。
细胞毒性测试需要从细胞接种密度、培养时间、DMSO耐受性、Z-prime test、edge effect、化合物验证几个方面来考虑。
1. 细胞接种密度
2. 培养时间
3. DMSO耐受性
4&5. Z-prime test and edge effect
6. 化合物验证
Plate layout：
细胞活力>80%
不同细胞密度的板中的种子细胞
培养72~96小时，CTG/CCK8检测细胞活力
在线性范围内选择 CTG/CCK8 信号的密度
窗口（信号本底比）>2
选择优化的密度和种子细胞
在不同时间点孵育细胞/化合物
使用 CTG/CCK8 检测细胞活力
具有最佳检测窗口和数据质量的时间点将用于进一步的实验
不同剂量的DMSO与细胞孵育72至96小时，CTG法检测细胞活力
注意：细胞检测中 DMSO 的含量通常低于 0.5%
QC标准：Z’>0.4，窗口>2
通常边缘孔不会用于长期培养
阳性化合物应为参考数据的 5 倍
高通量筛选依靠自动化来快速测试大量化合物，高通量筛选中生成的大量数据需要强大的数据处理和分析工具。专门的软件和算法可以用于处理、分析和可视化结果，使研究人员能够识别潜在的“苗头化合物”或表现出所需活性的化合物。
高通量筛选加速了药物发现过程，使其更具成本效益和效率，使研究人员能够快速筛选多种化合物，从而减少识别潜在候选药物所需的时间。HTS 通常是一个迭代过程，包含多轮筛选、命中验证和先导化合物优化。研究人员根据早期筛选的结果和经验来完善他们的化合物库和测定方法。
1、测定优化（Z’、测定窗口、DMSO 耐受性、参考化合物测试）
2、将首先对数千种化合物进行试点研究以测试该测定法
3、还将建立正交测定法以消除假阳性化合物
4、对数以万计的化合物运行 HTS
5、命中率通常会设置为0.1%到0.5%
